ELISA實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過(guò)2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但最好有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
3、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
4、溫浴時(shí)，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。
5、洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，沒(méi)有洗板機(jī)時(shí)，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
6、洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
7、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、實(shí)驗(yàn)時(shí)，要使底物避光保存。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
11、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會(huì)自然流下去。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中需留心下列的細(xì)節(jié)：
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)刻和溫度進(jìn)行溫育以保證成果。一切試劑都必須在運(yùn)用前到達(dá)室溫20-25℃。運(yùn)用后當(dāng)即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確能夠?qū)е虏坏某晒Ｔ诩尤氲孜锴按_保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔枯燥掉。
3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的色彩，現(xiàn)已變藍(lán)的底物液不能運(yùn)用。
5. 防止試劑和標(biāo)本的穿插污染以免形成錯(cuò)誤成果。
6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)防止強(qiáng)光直接照射。
7. 平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反響試劑不能觸摸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)損壞試劑盒中反響試劑的生物活性。
9. 不能運(yùn)用過(guò)期產(chǎn)品。
10. 假如可能傳播疾病，一切的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)設(shè)備。
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